2~3节的枝段作为快繁材料,切口制作与带叶离体材料制作相同。材料的大小要适宜,过大繁殖系数低,过小繁殖系数虽高,但材料对外界环境的抗逆性会有所降低。
2.离体材料处理
离体材料的处理,在植物非试管克隆技术体系中不是主导因素,它只起到调节促进与辅助的作用,对于一些难生根的植物种类或者第一代苗启动培养时,却可起到极为重要的促进作用,也是快繁过程中不容疏忽的一个重要环节。也就是对于内源激素比例含量的调节,对于糖的调节,对于生长素激活剂的调节,对于抑制障碍物质清除的调节,这里就常用的几种进行介绍。
(1)生根阻碍物质的清除:对难以生根的植物,在处理离体材料时,应首先考虑清除生根的有害物质,其生根能力往往能够得到显著提高。离体材料中含有阻碍生根的物质有单宁、树胶、松节油、香脂及其他树脂,具有挥发性的特殊成分和氧化酶等,但主要是除去离体材料中的单宁和其他特殊成分如氧化酶,减轻其有害作用。在处理时一般是将离体材料的基部,放进处理液中浸泡,要根据不同植物和母本年龄,选择适当的溶液,才能显示其效果。例如,樟树、一品红、冬青、卫矛等离体材料,用清水浸泡都能取得良好效果,用1%~3%的酒精溶液处理杜鹃花科植物或洋蔷薇6h,以及用0.05%~0.1%的硝酸银处理杨梅、栗等,用高锰酸钾的0.1%~1%的水溶液对水蜡、女贞等许多树种的处理一般都有效果。上述各种处理,不仅清除妨碍生根的物质或消除其有害作用,而且有的还能起到促进生根的作用。由于在清除妨碍生根物质的同时,离体材料中的生根所必需的物质,在一定程度上渗出而散失掉,因而有必要对生根所必需的物质进行补充。特别是生根困难的树种或品种,应对离体材料进行植物生长激素、维生素、糖类、氮素化合物等的补充处理,主要方式是浸泡法或叶面喷施法。
(2)生根促进物质处理:对于离体材料中含量不足,而且又是生根所必需的物质进行补充,以提高离体材料的生根能力。这类处理中,除了以植物生长激素处理为主体外,还有用维生素、糖类和含氮化合物等进行处理。在这些生根物质促进处理中,以植物生长激素的应用最广泛,对许多生根不良的植物,处理效果都很显著,可单独进行,也可和其他药剂或处理方法并用,更能增强处理的效果。
植物生长激素的种类很多,作为生根促进剂常在生产上应用约有吲哚丁酸、吲哚乙酸、萘乙酸以及萘乙酰胺等。在实际应用中都具有显著效果,但是随着植物种类乃至品种的不同,药剂的效果往往有很大的差异,如果植物生长激素的种类选用不当,反而会引起药害,降低快繁成活率。例如,大叶蔷薇用吲哚丁酸处理具有促进生根的效果,用萘乙酸处理就没有效果;而相反,水蜡树用萘乙酸处理有效果,用吲哚丁酸却没有效果,无刺槐用萘乙酸处理,促进生根的效果非常显著;从柳杉、松类来看,萘乙酸处理的效果却比较差,而且不稳定。因此,在进行处理时,应注意植物生长激素的种类,不要用错。为了解决这个问题,使药剂能适用于多种树种或品种,可以将药剂混合使用。有的树种的离体材料,进行一次处理不能完全达到目的,需要进行再处理才能取得显著效果。ABT生根粉是一种复合型植物生根促进剂,具有高效和广谱性。
处理的容器避免用金属制品,因金属制品容易降低药效,可用玻璃、聚氯乙烯或磁制的清洁容器。处理场所最好选择阴凉而不太干燥的地方,在这样的条件下温度较低,能取得持续稳定的效果。离体材料应保持洁净和含水饱满的状态,基部切口朝下,不可颠倒,大致插入处理液中2~4cm深。处理后不要再浸水或用水冲洗,应直接进行快繁。如果进行大规模快繁育苗时,要采用大型容器,可将离体材料每20~50根一捆,再进行药剂处理。
在进行生长素处理时,药剂的配制是首要环节,配制时可用母液法,先配成高浓度母液,使用时再稀释成适宜浓度的生产液。操作时将生根素 |